多功能净化柱-液相色谱法测定中药莲子中黄曲霉毒素含量

中药莲子中黄曲霉毒素应用案例

样品提取：

Ÿ 称取5g莲子样品（粉碎并过1mm分样筛）于50mL离心管中，加入20mL提取液（90%乙腈/水）混匀

Ÿ 超声提取30min，放入离心机（8000r/min离心20min），取上清液作为样品提取液

样品净化：

Ÿ 步骤1：向试管中加入5mL样品提取液

Ÿ 步骤2：将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端

Ÿ 步骤3：将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中

Ÿ 步骤4：取2mL净化提取液，氮吹至干，用1mL或0.5mL初始流动相复溶，过微孔滤膜，上机分析

HPLC检测条件：

Ÿ 流动相：A相，水；B相，乙腈-甲醇（50:50，v:v）

Ÿ 等梯度洗脱条件：A，68%；B，32%

Ÿ 色谱柱：C18柱（柱长250mm，柱内径4.6mm，填料粒径5μm）

Ÿ 流速：1.0mL/min

Ÿ 柱温：40℃

Ÿ 进样量：50μL

Ÿ 荧光检测：激发波长：360nm；发射波长：440nm，光化学柱后衍生

实验结果：

黄曲霉毒素混标液相色谱图

(AFG1和B1浓度为2ng/mL；AFG2和B2浓度为0.6ng/mL）

莲子样品与莲子加标样品对比图

(AFG1和B1加标浓度为4ng/g；AFG2和B2加标浓度为1.2ng/g)

莲子样品最低检出限、加标回收率与重复性

(AFG1和B1加标浓度为4ng/g；AFG2和B2加标浓度为1.2ng/g)